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      厭氧盒的使用與操作要點(diǎn)

      更新時(shí)間:2024-09-22   點(diǎn)擊次數(shù):991次
        厭氧盒作為一種重要的實(shí)驗(yàn)室工具,主要用于在無氧或低氧環(huán)境下培養(yǎng)微生物,尤其是厭氧菌。其使用與操作要點(diǎn)涉及準(zhǔn)備階段、操作過程、注意事項(xiàng)等多個(gè)方面,以下是對(duì)這些要點(diǎn)的詳細(xì)闡述。
        一、準(zhǔn)備階段
        1.器材準(zhǔn)備:首先,需要準(zhǔn)備相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)器材,如培養(yǎng)基、試管、移液器、鑷子等,并確保這些器材已經(jīng)過高溫和高壓消毒,以保證實(shí)驗(yàn)的潔凈度。同時(shí),厭氧盒本身也需要進(jìn)行清潔和消毒處理。
        2.環(huán)境準(zhǔn)備:實(shí)驗(yàn)環(huán)境應(yīng)保持無菌,通常需要在超凈工作臺(tái)或無菌室內(nèi)進(jìn)行操作。此外,還需準(zhǔn)備好氮?dú)狻⒒旌蠚怏w(如N2:H2:CO2=85%:10%:5%)等氣體源,以及真空泵、流量計(jì)等輔助設(shè)備。
        3.厭氧盒檢查:打開厭氧盒前,應(yīng)檢查其密封性是否良好,確保無漏氣現(xiàn)象。同時(shí),觀察該工具內(nèi)部的紫色色帶(如果有的話),確保其完整且未變色,這有助于判斷盒內(nèi)是否已達(dá)到厭氧狀態(tài)。
        二、操作過程
        1.放置樣品:在無菌操作環(huán)境下,將要進(jìn)行培養(yǎng)的微生物樣品用移液器均勻滴入培養(yǎng)盒中,注意控制樣品的體積,避免超過培養(yǎng)盒的最高液位線。
        2.密封厭氧盒:將培養(yǎng)盒的蓋子迅速且緊密地蓋上,確保盒內(nèi)空氣被排出。在密封過程中,應(yīng)避免觸摸或移動(dòng)內(nèi)部的紫色色帶。
        3.氣體置換:利用真空泵和氣體源進(jìn)行多次氣體置換,以排除盒內(nèi)的氧氣并充入氮?dú)饣蚧旌蠚怏w。通常需要進(jìn)行多次置換(如三次以上),以確保盒內(nèi)形成穩(wěn)定的厭氧環(huán)境。
        4.催化除氧(如適用):對(duì)于某些類型的厭氧盒,可能需要打開內(nèi)置的除氧劑(如鈀粒除氧劑)和接通除氧催化器電源進(jìn)行催化除氧。這一步驟有助于進(jìn)一步降低盒內(nèi)的氧含量。
        5.培養(yǎng)觀察:將密封好的厭氧盒放入?yún)捬跖囵B(yǎng)箱中,設(shè)置好所需的溫度和時(shí)間等培養(yǎng)條件。在培養(yǎng)過程中,應(yīng)定期檢查該工具的密封性和厭氧狀態(tài)(如通過觀察紫色色帶是否變色)。培養(yǎng)結(jié)束后,打開工具觀察微生物的生長(zhǎng)情況并進(jìn)行記錄和分析。
        三、注意事項(xiàng)
        1.無菌操作:整個(gè)操作過程中應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)范,避免雜菌污染。
        2.氣體置換:在進(jìn)行氣體置換時(shí),應(yīng)確保充入的氣體流量適中且穩(wěn)定,避免產(chǎn)生過大的氣流擾動(dòng)影響厭氧環(huán)境的形成。
        3.密封性檢查:每次使用前和使用后都應(yīng)檢查厭氧盒的密封性是否良好,如有漏氣現(xiàn)象應(yīng)及時(shí)處理。
        4.安全使用:在操作過程中應(yīng)注意安全用電和用氣避免發(fā)生觸電或氣體泄漏等安全事故。
        5.定期維護(hù):厭氧培養(yǎng)箱及其配套設(shè)備應(yīng)定期進(jìn)行清潔和維護(hù)保養(yǎng)以確保其正常運(yùn)行和延長(zhǎng)使用壽命。
        厭氧盒的使用與操作要點(diǎn)涉及多個(gè)方面需要實(shí)驗(yàn)人員在操作前做好充分的準(zhǔn)備和檢查工作并嚴(yán)格遵守操作規(guī)程和注意事項(xiàng)以確保實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行和結(jié)果的準(zhǔn)確性。
       

       

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